Σε πειράματα αλυσιδωτής αντίδρασης πολυμεράσης (PCR), η συσκευασία αντιδραστηρίων και δειγμάτων επηρεάζει άμεσα την ακρίβεια και την ασφάλεια των πειραματικών αποτελεσμάτων. Οι τυποποιημένες διαδικασίες συσκευασίας PCR πρέπει να τηρούν αυστηρά τις αρχές της στειρότητας, της πρόληψης της μόλυνσης και της καθαρής επισήμανσης. Οι συγκεκριμένες διαδικασίες περιγράφονται παρακάτω.
1 Προετοιμασία
Πριν προχωρήσετε, φορέστε ένα παλτό εργαστηρίου, γάντια και μάσκα για να εξασφαλίσετε ένα καθαρό περιβάλλον (συνιστάται ένα καθαρό πάγκο ή υπουργικό συμβούλιο). Ελέγξτε ότι όλα τα αναλώσιμα (π.χ. σωλήνες φυγοκεντρότητας, πλάκες PCR) είναι απαλλαγμένες από μόλυνση DNase/RNase και χρησιμοποιούν αυτόκλειστο ή ένζυμο - δωρεάν αποστειρωτές. Τα αντιδραστήρια (π.χ. εκκινητές, DNA προτύπου, ένζυμα κ.λπ.) θα πρέπει να είναι κιμιδωτά σε μεμονωμένα φιαλίδια για να αποφευχθεί η επαναλαμβανόμενη κατάψυξη - απόψυξης κύκλων.
2. Επιδίωξη και επισήμανση
Αντιδραστήρια υποπολλαπλασιασμού: Χρησιμοποιήστε μια πιπέτα για να διανέμετε κύριο μίγμα, εκκινητές κ.λπ. σε σωλήνες φυγοκέντρησης ή φρεάτια πλάκας PCR σύμφωνα με πειραματικές ανάγκες, διανέμοντας με ακρίβεια κάθε όγκο στο πλησιέστερο μικρολίτρα. Χρησιμοποιήστε συμβουλές μίας χρήσης για να αποφύγετε τη μόλυνση σταυροειδούς -.
Πρότυπα επισήμανσης: Όλα τα δοχεία πρέπει να επισημαίνονται σαφώς με το όνομα, τη συγκέντρωση, την ημερομηνία και τον αριθμό του χειριστή. Οι αδιάβροχες ετικέτες ή η άμεση χαρακτική συνιστώνται για την πρόληψη δυσανάγνωστων σημάτων.
3. Συσκευασία και σφράγιση
Μετά από καμαριέρα, σφίξτε αμέσως τα καπάκια των σωλήνων φυγοκεντρητή ή σφραγίστε τις πλάκες PCR (χρησιμοποιώντας τη θερμότητα - μεμβράνη σφράγισης ή εξειδικευμένη συγκολλητική μεμβράνη) για να αποφευχθεί η διαρροή. Για το Long - αποθηκευτικό χώρο, συνιστάται να τοποθετήσετε τη συσκευασία σε μια σφραγισμένη τσάντα και να προσθέσετε ένα αποξηραμένο (όπως σφαιρίδια πυριτικής γέλης) για να διατηρήσετε ένα ξηρό περιβάλλον.
4. Αποθήκευση και μεταφορά
Μετά τη συσκευασία, τα αντιδραστήρια PCR θα πρέπει να αποθηκεύονται ξεχωριστά σε - 20 μοίρες (μακρύ - όρος) ή 4 βαθμοί (βραχυπρόθεσμα) για να αποφευχθούν οι διακυμάνσεις της θερμοκρασίας. Η μεταφορά θα πρέπει να πραγματοποιείται σε ένα μονωμένο δοχείο γεμάτο με υλικό μαξιλαριού για να αποφευχθεί η διαρροή και η διαρροή. Για τα βιολογικά δείγματα, απαιτείται συμμόρφωση με τις απαιτήσεις συσκευασίας βιοασφάλεια βάσει του ΟΗΕ 3373 ή των σχετικών κανονισμών.
Οι τυποποιημένες διαδικασίες συσκευασίας PCR είναι απαραίτητες για την πειραματική αξιοπιστία. Ο αυστηρός ασηπτικός έλεγχος και η καθαρή επισήμανση μπορούν να μειώσουν αποτελεσματικά τους κινδύνους μόλυνσης και να εξασφαλίσουν την ακρίβεια των δεδομένων.
